植物ELISA试剂盒的方法类型和操作步骤
双抗体夹心法
双抗体夹心法是检测抗原常用的方法,操作步骤如下:
⑴将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。
⑵加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。
⑶加酶标抗体:使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。
⑷加底物:夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。
根据同样原理,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物,即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。
ELISA的主要原理很简单,有这么三个:
1、包被抗原或者抗体能以物理性吸附于固相载体表面,可能原理是蛋白质和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,吸附之后能保持抗原抗体反应等免疫活性;
2、标记抗原或者抗体可通过共价键与酶连接成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫活性和酶的催化特点;
3、显色酶结合物与相应包被在固相载体的抗原或者抗体结合后,也被固定在固相载体上,加入酶的底物之后可出现显色反应,根据反应的颜色深浅可计算抗原或者抗体的相对含量。ELISA实验设计根据检测对象的不同,我分别给童鞋们介绍抗原的检测方法设计和抗体的检测方法设计。抗原的检测设计1、双抗夹心法针对至少2个抗原决定簇的多价抗原。
产品特点
1、灵敏、特异的抗体;
2、稳定的重复性和可靠性;
3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
5、节省实验经费。
更多信息:植物ELISA试剂盒
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